Клинико-прогностическое значение определения эластина и ламинина при недифференцированной дисплазии соединительной ткани у детей | Черкасов Н.С., Доронина Т.Н., Прахов А.В., Луценко Ю.А.

Введение

Известно, что в развитии недифференцированной дисплазии соединительной ткани (НДСТ) важную роль играют нарушения синтеза и/или распада элементов внеклеточного матрикса соединительной ткани. Дисбаланс этой сложной системы, будь то аномальная пролиферация ткани или деградация коллагенoв, дефекты в их структурных генах или аномалии различных модификаций, может приводить к дисплазии [1–3]. В структуре внеклеточного матрикса важное место занимают белки эластин и ламинин. Они регулируют взаимоотношения между эластиновой сердцевиной и микрофибриллами. Ламинин может взаимодействовать со всеми структурными компонентами базальных мембран. Комплексная оценка уровней этих белков повышает информативность проводимых исследований дисплазий. Это обосновывает необходимость одновременного изучения этих двух белков для оценки диспластических процессов [4–8].

В связи с возможностью прогрессирования диспластического процесса у детей целесообразно прогнозировать его риск в раннем возрасте [1, 2, 4]. В литературе описаны методы прогнозирования, основанные на выявлении фенотипических признаков с их количественной оценкой.

В последнее время используют одновременное исследование фенотипических и висцеральных признаков НДСТ. Известно, что различные изменения клапанов сердца, аномалии хорд, пиелоэктазия, каликоэктазия и др. являются неблагоприятными прогностическими критериями проявления дисплазии. При прогнозировании важную роль играют научно обоснованные методы индивидуального прогноза вероятности развития тяжелых форм заболевания [1, 2, 9].

Имеющиеся в настоящее время лабораторные методы определения кортизола, магния, секреторного иммуноглобулина А, антител к коллагену, лактатдегидрогеназы и др. не могут быть приняты за основу определения риска прогрессирования НДСТ [10]. Для повышения достоверности прогнозирования прогрессирования НДСТ целесообразно исследовать значение уровней других белков внеклеточного матрикса: ламинина и эластина.

Таким образом, малоизученность аспектов патогенеза НДСТ, трудности диагностики и прогрессирующее течение заболевания определяют актуальность исследований в этой области.

Цель исследования: установить клинико-прогностическое значение эластина и ламинина при НДСТ у детей.

Материал и методы

Под наблюдением находились 47 детей с НДСТ в возрасте от 3 до 6 лет. В контрольную группу вошли 20 детей того же возраста без фенотипических и висцеральных признаков НДСТ. Диагностика заболевания проводилась на основании исключения генетической патологии (анализ родословной, консультация генетика и др.). Интерпретацию фенотипических и висцеральных признаков выполняли c учетом рекомендаций «Наследственные и многофакторные нарушения соединительной ткани у детей» (2016) [1].

Для постановки диагноза учитывалось наличие 6 или более фенотипов в сочетании с висцеральными (одним и более) признаками дисплазии. Анализировались данные ультразвуковой оценки состояния сердечно-сосудистой и мочевыделительной систем.

Из биохимических показателей исследовали уровни эластина и ламинина в сыворотке крови сэндвич-методом ИФА с использованием высокочувствительных наборов для определения количественного уровня эластина (серия HBE-337 Hu № 4 DF58C0861) и ламинина (серия HBE082Hu № 7B578DDCCD) компании Cloud-Clone Corp. Все исследования проводились при поступлении в стационар и в динамике через 2 года.

Для прогнозирования использовали метод математического моделирования, основанный на принципах расчета прогностических коэффициентов (ПК). Для каждого фактора и его градации вычисляли ПК по информационному варианту формулы Байеса:

ПК = 10 × 1g Р (X / А),

                         Р (X / B)

где P (X / A) — частота встречаемости фактора X при состоянии A; P (X / B) — частота встречаемости фактора X при альтернативном состоянии B.

Их информативность выражалась в количественных значениях признаков. Прогностические показатели определяли методом Е.В. Гублера [11], после чего их объединяли в прогностическую таблицу [12]. По каждому из признаков (наличие/отсутствие) вычисляли сумму баллов с последующим ее сравнением с пороговой. Для оценки характера связи между признаками использовали коэффициент корреляции Пирсона (Statistica 10).

Результаты исследования

В основной группе детей с НДСТ определялись следующие фенотипические признаки: высокое готическое небо — 9 (19,1%), умеренная гипермобильность суставов — 7 (14,9%), плоская грудная клетка — 5 (10,6%), плоскостопие 1–2-й степени — 5 (10,6%), кифоз позвоночника 1-й cтепени — 2 (4,2%), лицевой дисморфизм — 2 (4,2%), морщинистая кожа — 1 (2,1%) и др. 

Среди висцеральных признаков выделялись: пролапс митрального клапана с регургитацией 1-й степени — 12 (25,5%), эктопически расположенные хорды левого желудочка — 11 (23,4%), открытое овальное окно — 9 (19,1%), расширение восходящей аорты — 5 (10,6%), пиелоэктазия 1–2-й степени — 8 (17,0%), нефроптоз 1-й степени — 7 (14,9%). Сочетание висцеральных признаков наблюдалось у 18 (38,3%) пациентов.

По результатам анализа лабораторных данных все дети были разделены на 2 подгруппы: в первую подгруппу вошли 27 (57,4%) пациентов со значениями эластина от 5,2 нг/мл до 9,2 нг/мл и ламинина от 23,4 пг/мл до 42,0 пг/мл; вторую подгруппу составили 20 (42,6%) детей, у которых выявлены уровни эластина от 9,3 нг/мл до 13,7 нг/мл, а ламинина — от 42,1 пг/мл до 47,3 пг/мл. Пограничные цифры получены по результатам статистической обработки данных уровней белков [12]. Выявленные значения биохимических показателей достоверно отличались от таковых в группе сравнения (р<0,05; р₁<0,01). Уровни эластина меньше 5,2 нг/мл и ламинина меньше 23,4 пг/мл встречаются в единичных случаях и не могут использоваться для прогнозирования.

Нами определена прогностическая значимость отдельных фенотипических, инструментальных и лабораторных факторов (100). Из них выделены 28 наиболее часто встречающихся, использованных в дальнейшем для непосредственного расчета ПК. Была проведена сортировка признаков и определение ПК.

Наиболее значимыми признаками были следующие: кифоз позвоночника (ПК=0,5), плоская грудная клетка (ПК=0,25), умеренная гипермобильность суставов (ПК=0,75), открытое овальное окно (ПК=0,7), эктопически расположенная хорда левого желудочка (ПК=2,75), пиелоэктазия (ПК=1,8), нефроптоз (ПК=0,5), сочетания висцеральных признаков (ПК=2,5), повышенные уровни эластина (ПК=2,75) и ламинина (ПК=3,5). Остальные признаки имели меньшую прогностическую значимость. Обращает на себя внимание то, что значения ПК, характерные для некоторых фенотипических и инструментальных данных, существенно ниже таковых у изученных биохимических тестов. Это обусловливает важность использования эластина и ламинина в прогнозировании прогрессирования НДСТ.

Нами были определены значения прогностических порогов, получаемые суммированием ПК, которые позволяют говорить о высоком (15–17), умеренном (8–14) и низком (или отсутствии) (4–7) риске прогрессирования НДСТ.

При первичном обследовании у 24 детей по сумме ПК величина порога составила от 15 до 17, у 14 — от 8 до 14, у 9 детей — от 4 до 7.

Полученные результаты прогнозирования были подтверждены при обследовании наблюдаемых детей в динамике через 2 года. У 36 пациентов отмечалось прогрессирование НДСТ, а у 11 не наблюдалось такового, так как это были преимущественно дети из подгруппы низкого риска. Об этом свидетельствует также нарастание количества и степени выраженности фенотипических и висцеральных признаков в подгруппах высокого и умеренного риска. Ретроспективный анализ детей с прогрессированием НДСТ показал увеличение количества фенотипических признаков у одного пациента от 6 до 9, а висцеральных — от 1 до 4, при этом отмечалось повышение степени их выраженности. Следовательно, точность прогноза, основанного на использовании комплекса прогностических показателей — фенотипических, висцеральных и биохимических, — подтверждена в динамике. Это свидетельствует о высокой эффективности (79%) прогнозирования с использованием ламинина и эластина.

Обсуждение

В прогнозировании риска прогрессирования НДСТ важную роль играют фенотипические признаки и выраженность висцеральных проявлений. Однако их применение позволяет с высокой достоверностью прогнозировать риск прогрессирования дисплазии у детей старше 7 лет [1, 2, 4]. В то же время у детей более младшего возраста точность подобного прогноза ниже. Нами установлено, что определение уровней эластина и ламинина при оценке риска прогрессирования НДСТ повышает ее точность. При этом степень риска может быть высокой или низкой, что указывает на возможную связь с различными вариантами течения диспластических процессов при НДСТ. Важное прогностическое значение изученных белков подтверждено уровнями их ПК, которые были сопоставимы или выше, чем у ведущих фенотипических и висцеральных признаков.

Учитывая патогенетическое значение изученных белков в развитии диспластических процессов, можно считать эти показатели информативными в оценке риска прогрессирования НДСТ у детей в возрасте 3–6 лет. Есть основания полагать, что выявленная высокая прогностическая значимость эластина и ламинина связана с возрастом изучаемой группы детей. Определение изменений содержания этих белков и их ПК позволяет повысить качество прогноза. В связи с этим возникает необходимость использования изученных показателей в качестве дополнительных критериев при прогнозировании риска прогрессирования НДСТ у детей до 7 лет.

Своевременное прогнозирование риска прогрессирования НДСТ дает возможность проводить раннюю профилактику развития тяжелых форм НДСТ. Существующие методы профилактики позволяют снизить вероятность развития этих форм заболевания.

Заключение

Комплексное изучение фенотипических, висцеральных и биохимических признаков позволило установить их прогностическое значение при НДСТ у детей в возрасте 3–6 лет. Из всего многообразия признаков нами были выделены наиболее информативные прогностические показатели: кифоз позвоночника, плоская грудная клетка, гипермобильность суставов, открытое овальное окно, эктопически расположенная хорда левого желудочка, пиелоэктазия, нефроптоз, сочетания висцеральных признаков, повышение уровней ламинина и эластина. Исследование показало, что уровни эластина и ламинина целесообразно учитывать как дополнительные критерии оценки прогрессирования дисплазии. При значениях уровней эластина от 9,3 нг/мл до 13,7 нг/мл и ламинина от 42,1 пг/мл до 47,3 пг/мл можно прогнозировать высокий риск прогрессирования НДСТ у детей в возрасте от 3 до 6 лет. В целом комплексное использование фенотипических, висцеральных и биохимических показателей позволяет расширить возможности в прогнозировании риска прогрессирования дисплазии соединительной ткани.

Сведения об авторах:

Черкасов Николай Степанович — д.м.н., профессор, профессор кафедры госпитальной педиатрии с курсом последипломного образования ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России; 414000, Россия, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121; ORCID iD 0000-0001-9532-5446.

Доронина Татьяна Николаевна — д.м.н., доцент, профессор кафедры госпитальной педиатрии с курсом последипломного образования ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России; 414000, Россия, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121; ORCID iD 0000-0001-7353-3615.

Прахов Андрей Валерьевич — д.м.н., профессор, профессор кафедры госпитальной педиатрии ФГБОУ ВО ПИМУ Минздрава России; 603950, Россия, г. Нижний Новгород, пл. Минина и Пожарского, д. 10/1; ORCID iD 0000-0002-7978-3831.

Луценко Юлия Анатольевна — врач-нефролог ГБУЗ «ДГП № 150 ДЗМ»; 109341, Россия, г. Москва, ул. Братиславская, д. 1; ORCID iD 0000-0001-6336-7887.

Контактная информация: Черкасов Николай Степанович, e-mail: kafedra1@mail.ru.

Прозрачность финансовой деятельности: никто из авторов не имеет финансовой заинтересованности в представленных материалах или методах.

Конфликт интересов отсутствует.

Статья поступила 27.09.2021.

Поступила после рецензирования 20.10.2021.

Принята в печать 16.11.2021.

About the authors:

Nikolay S. Cherkasov — Dr. Sc. (Med.), Professor, professor of the Department of Hospital Pediatrics with the Course of Postgraduate Education, Astrakhan State Medical University; 121, Bakinskaya str., Astrakhan, 414000, Russian Federation; ORCID iD 0000-0001-9532-5446.

Tatyana N. Doronina — Dr. Sc. (Med.), Associate Professor, professor of the Department of Hospital Pediatrics with the Course of Postgraduate Education, Astrakhan State Medical University; 121, Bakinskaya str., Astrakhan, 414000, Russian Federation; ORCID iD 0000-0001-7353-3615.

Andrey V. Prakhov — Dr. Sc. (Med.), Professor, professor of the Department of Hospital Pediatrics, Privolzhsky Research Medical University; 10/1, Minin and Pozharsky sq., Nizhny Novgorod, 603950, Russian Federation; ORCID iD 0000-0002-7978-3831.

Yuliya A. Lutsenko — nephrologist, Children’s City Polyclinics No. 150; 1, Bratislavskaya str., Moscow, 109341, Russian Federation; ORCID iD 0000-0001-6336-7887.

Contact information: Nikolay S. Cherkasov, e-mail:
kafedra1@mail.ru.

Financial Disclosure: no authors have a financial or property interest in any material or method mentioned.

There is no conflict of interests.

Received 27.09.2021.

Revised 20.10.2021.

Accepted 16.11.2021.